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学者姓名：池雪林
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Abstract ：
细菌病综合实习是提升动物医学专业预防兽医学实践教学质量的重要环节。针对传统预防兽医学中细菌学实验内容零碎、不系统的现状，本文提出融合细菌学相关实验技术，开展连续性好、综合性强的细菌病综合实习。该实习从混合细菌感染动物人工造病开始，通过一系列实验技术手段分离、纯化和鉴定细菌，进而确诊病因，实施后显著提升了学生的综合实践能力和科研创新水平，有利于新时代高素质动物医学专业人才的培养。
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动物医学 动物医学 效果分析 效果分析 细菌病 细菌病 综合实习 综合实习 预防兽医学 预防兽医学
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| GB/T 7714 | 曾显成 , 池雪林 , 王松 et al. 预防兽医学细菌病综合实习的设计与实践 [J]. | 中国兽医杂志 , 2023 , 59 (03) : 154-157 . |
| MLA | 曾显成 et al. "预防兽医学细菌病综合实习的设计与实践" . | 中国兽医杂志 59 . 03 (2023) : 154-157 . |
| APA | 曾显成 , 池雪林 , 王松 , 陈叶 , 黄志坚 . 预防兽医学细菌病综合实习的设计与实践 . | 中国兽医杂志 , 2023 , 59 (03) , 154-157 . |
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Abstract ：
旨在明确福建某羊场引起山羊皮肤脓肿的病原,无菌采集脓液,进行细菌分离培养、培养特性观察、形态学镜检、生化试验及16S rRNA进化树分析,结果分离到1株细菌,经鉴定确定为伪结核棒状杆菌,命名LY20株。毒力因子检测显示,分离菌携带PLD、NanH、FagA、FagB、FagC、FagD、OppA、OppB、OppC、OppD、OppF共11个毒力因子。PLD全基因进化树分析,结果伪结核棒状杆菌分成羊型和马型2个独立分支,分离菌与羊型聚在同一分支,亲缘性最近,与另一个分支马型亲缘性较远。核苷酸和氨基酸同源性比较显示,分离菌与羊型伪结核棒状杆菌同源性分别为99.9%和99.7%,与马型伪结核棒状杆菌的同源性分别为98.1%～98.2%和97.4%。用4.4×10~8 CFU/mL菌液,0.2 mL/只,腹腔接种小鼠,48 h内死亡率达100.0%,表现出较强的致病性;皮下接种小鼠,接种部位出现脓肿、破溃后流出淡黄色脓液。病理切片观察,可见肝脏淤血,脾淋巴细胞坏死,肺脏出血及中性粒细胞浸润,肾小管上皮细胞坏死,十二指肠和直肠上皮细胞脱落、间质出血、淋巴细胞浸润;皮肤化脓坏死性肌炎,肉芽组织增生。药敏结果显示,分离菌对环丙沙星、恩诺沙星等28种药物敏感,对阿米卡星、卡那霉素等7种药物耐药。研究结果表明,本次山羊皮肤脓肿为伪结核棒状杆菌感染所致,且小鼠病理组织学变化主要表现为出血、坏死及化脓性炎症。
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伪结核棒状杆菌 伪结核棒状杆菌 分离鉴定 分离鉴定 山羊 山羊 毒力因子 毒力因子 病理学观察 病理学观察 药敏特性 药敏特性
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| GB/T 7714 | 王锐鸿 , 林昶 , 池雪林 et al. 山羊伪结核棒状杆菌LY20株分离鉴定及病理组织学观察 [J]. | 中国兽医学报 , 2021 , 41 (12) : 2411-2420 . |
| MLA | 王锐鸿 et al. "山羊伪结核棒状杆菌LY20株分离鉴定及病理组织学观察" . | 中国兽医学报 41 . 12 (2021) : 2411-2420 . |
| APA | 王锐鸿 , 林昶 , 池雪林 , 陈仕龙 , 曾显成 . 山羊伪结核棒状杆菌LY20株分离鉴定及病理组织学观察 . | 中国兽医学报 , 2021 , 41 (12) , 2411-2420 . |
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Abstract ：
为确诊福州某羊场患病山羊皮下脓肿的病因,采集脓液进行细菌分离、形态染色检镜、培养特性观察、生化试验及16S rRNA测序分析,结果分离鉴定出1株革兰阳性、形态不规则、具有β溶血现象的化脓隐秘杆菌,命名为LM01株。用分离菌皮下接种小鼠,能复制出与山羊自然感染相似的皮下脓肿临床病例,半数感染量(ID50)为1.65×107CFU/m L。病理组织学观察可见皮肤损伤处形成一个大的囊腔,腔内充满大量脓细胞,囊腔与肌层之间有大量成纤维细胞增生及中性粒细胞浸润。毒力基因检测显示分离株至少存在PLO、NanH、NanP、FimA、FimC、FimG等6个毒力基因,其中溶血素PLO是化脓隐秘杆菌最主要的毒力因子,又是宿主保护性抗原。PCR分段扩增PLO基因,得到全长1 605 bp,编码534个氨基酸,与GenBank中收录的其他参考株相比,核苷酸和氨基酸同源性分别为95.0%～99.8%和97.0%～99.8%。进化树分析显示,化脓隐秘杆菌分成Group 1(牛型)、Group 2(猪型)和Group 3(羊型)3个独立分支,本分离株归属在Group 3(羊型)分支,与重庆2012CQ-ZSH株亲缘关系最近。变异性分析发现,PLO基因仅发生点突变,没有插入或缺失现象;羊型与猪型、牛型相比,存在25处核苷酸特异性位点及5个特异性氨基酸位点:62(N/D)、340(T/A)、355(V/A)、384(F/Y)和470(A/L)。药敏试验表明,分离菌对恩诺沙星、强力霉素、阿米卡星等22种药物敏感,对阿奇霉素、复方新诺明、红霉素等6种药物耐药。结果表明,本次山羊患病的病原菌是化脓隐秘杆菌,本试验为病原学研究提供了参考。
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PLO毒力基因 PLO毒力基因 分离鉴定 分离鉴定 化脓隐秘杆菌 化脓隐秘杆菌 山羊 山羊 遗传进化分析 遗传进化分析
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| GB/T 7714 | 林昶 , 王锐鸿 , 胥焯然 et al. 山羊化脓隐秘杆菌LM01株分离鉴定及其毒力基因PLO遗传进化分析 [J]. | 中国兽医科学 , 2021 , 51 (09) : 1163-1174 . |
| MLA | 林昶 et al. "山羊化脓隐秘杆菌LM01株分离鉴定及其毒力基因PLO遗传进化分析" . | 中国兽医科学 51 . 09 (2021) : 1163-1174 . |
| APA | 林昶 , 王锐鸿 , 胥焯然 , 池雪林 , 陈仕龙 , 陈叶 et al. 山羊化脓隐秘杆菌LM01株分离鉴定及其毒力基因PLO遗传进化分析 . | 中国兽医科学 , 2021 , 51 (09) , 1163-1174 . |
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Abstract ：
为探明福州某患病大熊猫的病因,研究病原菌的生物学特性、药物敏感性及致病性,从患病大熊猫的粪便中分离、纯化病原菌,经培养特性、形态学观察、生化试验及16S rRNA PCR扩增、测序及进化树分析等系统鉴定,并对鉴定菌进行药敏试验、动物致病性试验、组织病理学观察及毒力因子检测。结果分离到1株具有迁徙生长特点的革兰阴性杆菌,生化特性与普通变形杆菌(Proteus vulgaris)相一致,16S rRNA基因序列与普通变形杆菌的相似性为99.9%,进化树分析显示,与普通变形杆菌处于同一分支,确定分离菌为普通变形杆菌,命名为GP19株。该分离菌至少携带ureC、mrpA、fli L、flhA、flhB、flhD和pmbA等7种毒力基因,小鼠腹腔接种后12 h内死亡,半数致死量(LD50)为9.73×106CFU/m L。病理切片观察可见肝、脾、肺、肾、脑等实质器官淤血、出血,十二指肠肠绒毛大量坏死、脱落。药敏试验表明,该菌对环丙沙星、头孢克肟和氨曲南等23种药物敏感,对林可霉素、强力霉素和头孢唑啉等13种药物耐药。以上研究表明,患病大熊猫粪便中存在携带多种毒力因子的普通变形杆菌,并表现出较强的致病力,可损伤肝、脾、肺、肾、脑及十二指肠等多个组织器官,对临床药物显示多重耐药,本研究结果为大熊猫的疫病防控提供了科学依据。
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分离鉴定 分离鉴定 大熊猫 大熊猫 普通变形杆菌 普通变形杆菌 致病性 致病性 药敏特性 药敏特性
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| GB/T 7714 | 曾显成 , 池雪林 , 修云芳 et al. 大熊猫源普通变形杆菌分离鉴定及致病性分析 [J]. | 中国兽医科学 , 2020 , 50 (11) : 1379-1388 . |
| MLA | 曾显成 et al. "大熊猫源普通变形杆菌分离鉴定及致病性分析" . | 中国兽医科学 50 . 11 (2020) : 1379-1388 . |
| APA | 曾显成 , 池雪林 , 修云芳 , 徐素慧 , 黄炎 , 李才武 . 大熊猫源普通变形杆菌分离鉴定及致病性分析 . | 中国兽医科学 , 2020 , 50 (11) , 1379-1388 . |
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Abstract ：
应用超薄切片和透射电子显微镜技术,研究猪伪狂犬病病毒(PRV)MQ18变异株感染绵羊胚胎鼻甲上皮细胞(OFTu)的病毒形态发生和超微结构变化。结果显示:病毒在细胞核内复制、增殖,形成核内包涵体,装配好的病毒通过核内膜获得初始囊膜,以出芽方式出核进入细胞质,在高尔基体区域进行加工修饰、二次获得囊膜后形成完整病毒粒子,以包裹有病毒粒子的空泡与细胞膜相互融合方式,将病毒释放到细胞外;细胞超微结构主要表现为细胞质内空泡增多,线粒体增生、肿大,空泡样变,粗面内质网扩张,高尔基体形态异常,细胞核染色质浓缩、边集,最后细胞破坏、裂解,可见细胞早期凋亡及自噬小体结构。本研究结果为阐明PRV的感染和致病机制提供了理论依据。
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OFTu细胞 OFTu细胞 伪狂犬病病毒 伪狂犬病病毒 形态发生 形态发生 超微结构 超微结构
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| GB/T 7714 | 曾显成 , 池雪林 , 陈珍珍 et al. 猪伪狂犬病病毒变异株感染绵羊胚胎鼻甲上皮细胞的病毒形态发生和细胞超微结构观察 [J]. | 中国兽医科学 , 2020 , 50 (04) : 500-505 . |
| MLA | 曾显成 et al. "猪伪狂犬病病毒变异株感染绵羊胚胎鼻甲上皮细胞的病毒形态发生和细胞超微结构观察" . | 中国兽医科学 50 . 04 (2020) : 500-505 . |
| APA | 曾显成 , 池雪林 , 陈珍珍 , 潘启东 , 修金生 . 猪伪狂犬病病毒变异株感染绵羊胚胎鼻甲上皮细胞的病毒形态发生和细胞超微结构观察 . | 中国兽医科学 , 2020 , 50 (04) , 500-505 . |
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Abstract ：
为了解福建地区猪圆环病毒2型(PCV2)感染病变及分子遗传演化情况,采集来自不同猪场29份临床疑似感染PCV2的组织病料,进行了病理学观察、PCR检测、全基因测序及分析。结果表明,淋巴小结及淋巴细胞数量减少,肺泡腔内炎性细胞浸润;29份病料检出20份PCV2阳性,阳性率为68.9%;获得20株完整PCV2全基因序列,同源性为96.0%～99.9%;进化树分析,1株为PCV2a(占5%),11株为PCV2b(占55%),8株为PCV2d(占40%);ORF2变异性分析,发现PCV2b和PCV2d分别存在1个和3个区别于其他基因型的独特氨基酸位点,PCV2b为210(E),PCV2d为53(I)、68(N)和133-134(AN)。研究结果充实了PCV2分子流行病学数据,为疫苗选择及基因型鉴别提供参考。
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Cap蛋白 Cap蛋白 全基因组 全基因组 猪圆环病毒2型 猪圆环病毒2型 病理学 病理学 遗传演化分析 遗传演化分析
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| GB/T 7714 | 池雪林 , 程洁 , 毛文潇 et al. 福建地区猪圆环病毒2型全基因序列遗传演化分析及病理学观察 [J]. | 动物医学进展 , 2020 , 41 (10) : 6-14 . |
| MLA | 池雪林 et al. "福建地区猪圆环病毒2型全基因序列遗传演化分析及病理学观察" . | 动物医学进展 41 . 10 (2020) : 6-14 . |
| APA | 池雪林 , 程洁 , 毛文潇 , 杨新炜 , 吴星星 , 张莹 et al. 福建地区猪圆环病毒2型全基因序列遗传演化分析及病理学观察 . | 动物医学进展 , 2020 , 41 (10) , 6-14 . |
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Abstract ：
Extensive drug resistance (XDR) is an escalating global problem. Escherichia coli strain Sanji was isolated from an outbreak of pheasant colibacillosis in Fujian province, China, in 2011. This strain has XDR properties, exhibiting sensitivity to carbapenems but no other classes of known antibiotics. Whole-genome sequencing revealed a total of 32 known antibiotic resistance genes, many associated with insertion sequence 26 (IS26) elements. These were found on the Sanji chromosome and 2 of its 6 plasmids, pSJ_255 and pSJ_82. The Sanji chromosome also harbors a type 2 secretion system (T2SS), a type 3 secretion system (T3SS), a type 6 secretion system (T6SS), and several putative prophages. Sanji and other ST167 strains have a previously uncharacterized O-antigen (O89b) that is most closely related to serotype O89 as determined on the basis of analysis of the wzm-wzt genes and in silico serotyping. This O89b-antigen gene cluster was also found in the genomes of a few other pathogenic sequence type 617 (ST617) and ST10 complex strains. A time-scaled phylogeny inferred from comparative single nucleotide variant analysis indicated that development of these O89b-containing lineages emerged about 30 years ago. Comparative sequence analysis revealed that the core genome of Sanji is nearly identical to that of several recently sequenced strains of pathogenic XDR E. coli belonging to the ST167 group. Comparison of the mobile elements among the different ST167 genomes revealed that each genome carries a distinct set of multidrug resistance genes on different types of plasmids, indicating that there are multiple paths toward the emergence of XDR in E. coli. IMPORTANCE E. coli strain Sanji is the first sequenced and analyzed genome of the recently emerged pathogenic XDR strains with sequence type ST167 and novel in silico serotype O89b:H9. Comparison of the genomes of Sanji with other ST167 strains revealed distinct sets of different plasmids, mobile IS elements, and antibiotic resistance genes in each genome, indicating that there exist multiple paths toward achieving XDR. The emergence of these pathogenic ST167 E. coli strains with diverse XDR capabilities highlights the difficulty of preventing or mitigating the development of XDR properties in bacteria and points to the importance of better understanding of the shared underlying virulence mechanisms and physiology of pathogenic bacteria.
Keyword ：
antibiotic resistance antibiotic resistance capsular polysaccharide capsular polysaccharide extensively drug resistant extensively drug resistant genome comparison genome comparison insertion sequence insertion sequence O-antigen O-antigen pathogen evolution pathogen evolution plasmid-mediated resistance plasmid-mediated resistance prophage prophage secretion systems secretion systems
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| GB/T 7714 | Zeng, Xiancheng , Chi, Xuelin , Ho, Brian T. et al. Comparative Genome Analysis of an Extensively Drug-Resistant Isolate of Avian Sequence Type 167 Escherichia coli Strain Sanji with Novel In Silico Serotype O89b:H9 [J]. | MSYSTEMS , 2019 , 4 (1) . |
| MLA | Zeng, Xiancheng et al. "Comparative Genome Analysis of an Extensively Drug-Resistant Isolate of Avian Sequence Type 167 Escherichia coli Strain Sanji with Novel In Silico Serotype O89b:H9" . | MSYSTEMS 4 . 1 (2019) . |
| APA | Zeng, Xiancheng , Chi, Xuelin , Ho, Brian T. , Moon, Damee , Lambert, Christine , Hall, Richard J. et al. Comparative Genome Analysis of an Extensively Drug-Resistant Isolate of Avian Sequence Type 167 Escherichia coli Strain Sanji with Novel In Silico Serotype O89b:H9 . | MSYSTEMS , 2019 , 4 (1) . |
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Abstract ：
本试验旨在原核表达、纯化羊口疮病毒ORF080蛋白并鉴定其反应性.根据GenBank已发表的羊口疮病毒OV-GO株ORF080基因序列(登录号:KP010354),将密码子优化后合成该序列并克隆至pET-32a(+)原核表达载体中,构建pET-32a(+)-ORF080重组质粒.经双酶切和测序鉴定后转化至大肠杆菌Rossetta感受态细胞中,用IPTG诱导,诱导产物经SDS-PAGE鉴定,重组蛋白以可溶性和包涵体两种形式获得表达.采用镍柱对可溶性重组蛋白进行纯化,再经SDS-PAGE和蛋白质免疫印迹双重鉴定.SDS-PAGE检测结果显示,在57 ku处出现单一重组蛋白条带;蛋白质免疫印迹鉴定证实该纯化的蛋白能与抗组氨酸标签的抗体和羊口疮阳性血清发生特异性反应,证明成功表达并纯化出具有良好反应性的ORF080蛋白.试验结果为进一步对ORF080蛋白结构、功能及基因工程疫苗的研究提供参考.
Keyword ：
ORF080蛋白 ORF080蛋白 原核表达 原核表达 羊口疮病毒 羊口疮病毒
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| GB/T 7714 | 陈珍珍 , 曾显成 , 池雪林 et al. 羊口疮病毒ORF080基因的原核表达、纯化及鉴定 [J]. | 福建农林大学学报(自然科学版) , 2019 , 48 (06) : 776-780 . |
| MLA | 陈珍珍 et al. "羊口疮病毒ORF080基因的原核表达、纯化及鉴定" . | 福建农林大学学报(自然科学版) 48 . 06 (2019) : 776-780 . |
| APA | 陈珍珍 , 曾显成 , 池雪林 , 白丁平 , 刘云辉 , 胡可慧 et al. 羊口疮病毒ORF080基因的原核表达、纯化及鉴定 . | 福建农林大学学报(自然科学版) , 2019 , 48 (06) , 776-780 . |
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Abstract ：
为了解福建省猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株的病原学特性及分子遗传变异情况,本研究用羊胚胎鼻甲细胞(OFTu)从疑似暴发伪狂犬病猪场死亡的育肥猪中分离到1株病毒,该病毒能够产生典型的PRV细胞病变,病毒液接种小鼠(0.1 mL/只)及成年兔(0.5 mL/只)在48～60 h死亡,均表现出典型的伪狂犬病症状。经PCR试验、电镜观察及特异性血清间接免疫荧光试验鉴定为伪狂犬病病毒,命名为MQ18株;并对其进行病毒效价的测定及gC、gE基因核苷酸和氨基酸序列差异性分析。结果显示,分离株TCID50为10~(-7.71)/0.1 mL;将其gC和gE基因序列与国内外17个PRV参考毒株进行同源性比较,核苷酸序列同源性分别为93.5%～99.9%和97.8%～100%,氨基酸序列同源性分别为88.7%～99.8%和95.7%～100%;分子遗传进化树分析显示,gC和gE基因均与国内近6年分离的PRV变异株集聚在一起,属于同一个进化分支;与经典株相比,gC基因编码的氨基酸序列在第63～69位有1个AAASTPA的连续7个氨基酸插入,gE基因编码的氨基酸序列分别在第48位和第496位有1个天冬氨酸(D)的插入,与PRV变异株变异位点相一致。以上结果证实,从发病猪群中分离到1株PRV变异株,本研究结果为选择合适疫苗来防控猪伪狂犬病以及病原学研究提供了参考。
Keyword ：
伪狂犬病病毒 伪狂犬病病毒 分离鉴定 分离鉴定 变异 变异 序列分析 序列分析
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| GB/T 7714 | 曾显成 , 池雪林 , 潘启东 et al. 猪伪狂犬病病毒MQ18变异株的分离鉴定 [J]. | 中国兽医科学 , 2019 , 49 (08) : 1025-1033 . |
| MLA | 曾显成 et al. "猪伪狂犬病病毒MQ18变异株的分离鉴定" . | 中国兽医科学 49 . 08 (2019) : 1025-1033 . |
| APA | 曾显成 , 池雪林 , 潘启东 , 陈珍珍 , 林琳 , 修金生 et al. 猪伪狂犬病病毒MQ18变异株的分离鉴定 . | 中国兽医科学 , 2019 , 49 (08) , 1025-1033 . |
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Abstract ：
采用羊胚胎鼻甲(OFTu)细胞对湖北某山羊养殖场疑似羊口疮(Orf)的病羊唇部痂皮组织进行病毒分离,通过病理组织学、电镜形态观察及PCR试验等方法对分离的病毒进行鉴定,证实分离毒株为羊口疮病毒(Orf virus,ORFV),命名为HuB13。分析HuB13 F1L基因序列,结果F1L基因全长为1 017 bp,编码339个氨基酸,G+C含量为64.70%。遗传进化树显示,HuB13与8株山羊和6株绵羊来源的ORFV同源性分别为97.50%～99.41%和97.15%～97.35%,与牛痘病毒(PCPV)和牛丘疹性皮炎病毒(BPSV)同源性分别为88.0%～88.69%和75.15%。Bioedit软件分析发现宿主为山羊和绵羊的ORFV存在1个高变异区(148～171 bp)和6个特异性位点G186C、T187G、A541G、A765G、G856A和G982A。研究结果为开发宿主特异的Orf疫苗及致病机理研究提供参考依据。
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F1L基因 F1L基因 分离鉴定 分离鉴定 电镜观察 电镜观察 羊口疮病毒 羊口疮病毒 遗传变异 遗传变异
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| GB/T 7714 | 曾显成 , 陈珍珍 , 林心宇 et al. 羊口疮病毒的分离鉴定及F1L基因的遗传变异分析 [J]. | 中国兽医学报 , 2019 , 39 (05) : 860-866 . |
| MLA | 曾显成 et al. "羊口疮病毒的分离鉴定及F1L基因的遗传变异分析" . | 中国兽医学报 39 . 05 (2019) : 860-866 . |
| APA | 曾显成 , 陈珍珍 , 林心宇 , 程洁 , 张晨凯 , 刘平 et al. 羊口疮病毒的分离鉴定及F1L基因的遗传变异分析 . | 中国兽医学报 , 2019 , 39 (05) , 860-866 . |
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