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学者姓名:黄伟峰
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Clean All
Abstract :
RNA viruses are often cited as a significant factor affecting the populations of both domestic honey bees and wild pollinators. To expedite the development of effective countermeasures against these viruses, a more comprehensive understanding of virus biology necessitates extensive collaboration among scientists from diverse research fields. While the infectious virus clone is a robust tool for studying virus diseases, the current methods for synthesizing infectious clones of bee-infecting RNA viruses entail the in vitro transcription of the viral genome RNA in 8-10 kb, presenting challenges in reproducibility and distribution. This article reports on the synthesis of an infectious clone of the Chinese variant sacbrood virus (SBV) using a DNA plasmid containing an Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) immediate-early protein (IE1) promoter to trigger transcription of the downstream viral genome within hosts. The results demonstrate that the IE1-SBV plasmid can synthesize SBV clones in a widely used lepidopteran immortal cell line (Sf9) and honey bee pupae. Furthermore, the negative strand of the clone was detected in both Sf9 cells and honey bee pupae, indicating active infection and replication. However, the transfection of Sf9 cells was observed in only a limited proportion (less than 10%) of the cells, and the infection did not appear to spread to adjacent cells or form infective virions. The injection of honey bee pupae with 2500 ng of the IE1-SBV plasmid resulted in high infection rates in Apis cerana pupae but low rates in A. mellifera pupae, although the dosage was comparatively high compared with other studies using in vitro transcribed viral RNA. Our findings suggest that the synthesis of bee-infecting RNA viruses using DNA plasmids is feasible, albeit requiring additional optimization. However, this method holds substantial potential for facilitating the production of clones with various sequence modifications, enabling the exploration of viral gene functions and biology. The ease of distributing infectious clones in DNA plasmid form may foster collaboration among scientists in applying the clone to bee biology, ecology, and behavior, ultimately offering a comprehensive approach to managing virus diseases in the future.
Keyword :
alternative hosts alternative hosts cDNA clones cDNA clones cell line cell line Iflavirus Iflavirus in-cell transcription in-cell transcription
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| GB/T 7714 | Yue, Dandan , Li, Runlin , Zhang, Jikailang et al. A DNA Plasmid-Based Approach for Efficient Synthesis of Sacbrood Virus Infectious Clones within Host Cells [J]. | VIRUSES-BASEL , 2023 , 15 (9) . |
| MLA | Yue, Dandan et al. "A DNA Plasmid-Based Approach for Efficient Synthesis of Sacbrood Virus Infectious Clones within Host Cells" . | VIRUSES-BASEL 15 . 9 (2023) . |
| APA | Yue, Dandan , Li, Runlin , Zhang, Jikailang , Chen, Yanping , Palmer-Young, Evan C. , Huang, Shaokang et al. A DNA Plasmid-Based Approach for Efficient Synthesis of Sacbrood Virus Infectious Clones within Host Cells . | VIRUSES-BASEL , 2023 , 15 (9) . |
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Abstract :
利用长片段PCR技术,以单一病蜂的cDNA为模板,扩增出完整蜜蜂残翅病毒基因组并构建感染性克隆。结果表明,该基因组在某些大肠杆菌内难以稳定克隆,说明蜜蜂残翅病毒分离株具有克隆不稳定性,克隆不稳定性可能仅存在于部分蜜蜂残翅病毒分离株和亚型。国内的蜜蜂残翅病毒分离株在亲缘关系上非常接近,国外的蜜蜂残翅病毒分离株也可能存在克隆不稳定性。
Keyword :
克隆不稳定性 克隆不稳定性 残翅病毒 残翅病毒 病毒基因组全长克隆 病毒基因组全长克隆
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| GB/T 7714 | 李润琳 , 金朗 , 黄伟峰 . 蜜蜂残翅病毒基因组全长克隆及其克隆不稳定性 [J]. | 福建农林大学学报(自然科学版) , 2023 , 52 (04) : 519-526 . |
| MLA | 李润琳 et al. "蜜蜂残翅病毒基因组全长克隆及其克隆不稳定性" . | 福建农林大学学报(自然科学版) 52 . 04 (2023) : 519-526 . |
| APA | 李润琳 , 金朗 , 黄伟峰 . 蜜蜂残翅病毒基因组全长克隆及其克隆不稳定性 . | 福建农林大学学报(自然科学版) , 2023 , 52 (04) , 519-526 . |
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Abstract :
通过分析西方蜜蜂工蜂感染东方蜜蜂微孢子虫Vairimorpha ceranae(Nosema ceranae)后,中肠蛋白质组的差异,探讨病原与中肠细胞的互作机制。给西方蜜蜂5日龄工蜂自由取食含10~4个·μL~(-1)的孢子蔗糖液48 h后,在30℃恒温饲养18 d(23日龄)。结果表明,感染组工蜂存活率仅为34.81%,显著低于对照组的71.85%(P<0.05),感染后工蜂中肠蛋白浓度显著下降(P<0.05),但两组的平均单只日均糖液消耗量没有显著差异(P>0.05)。通过串联质谱标签(TMT)定量蛋白分析系统比较了感染组与对照组工蜂的中肠蛋白质组差异,发现差异显著的蛋白共565个,其中感染中肠显著上调的蛋白有301个,显著下调的蛋白有264个。差异蛋白GO富集分析显示,感染对中肠细胞的细胞进程、能量代谢、细胞形态、蛋白质复合物、分子结合和催化活性等有显著影响;KEGG通路注释发现富集到氨酰-tRNA生物合成、内质网中的蛋白质加工、不同类型的N-聚糖生物合成显著上调,部分抗氧化相关的蛋白显著上调;而显著下调蛋白富集到氨基酸代谢和蔗糖代谢等通路。东方蜜蜂微孢子虫感染后期显著减弱西方蜜蜂工蜂的消化和免疫相关蛋白表达,这些差异显著蛋白为后续开展东方蜜蜂微孢子虫与西方蜜蜂的互作蛋白筛选与验证提供了重要支撑。
Keyword :
东方蜜蜂微孢子虫 东方蜜蜂微孢子虫 中肠 中肠 串联质谱标签 串联质谱标签 蛋白质组 蛋白质组 西方蜜蜂 西方蜜蜂
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| GB/T 7714 | 陈礼 , 黄伟峰 , 黄少康 . 东方蜜蜂微孢子虫感染西方蜜蜂工蜂中肠的蛋白质组学分析 [J]. | 畜牧兽医学报 , 2023 , 54 (04) : 1703-1712 . |
| MLA | 陈礼 et al. "东方蜜蜂微孢子虫感染西方蜜蜂工蜂中肠的蛋白质组学分析" . | 畜牧兽医学报 54 . 04 (2023) : 1703-1712 . |
| APA | 陈礼 , 黄伟峰 , 黄少康 . 东方蜜蜂微孢子虫感染西方蜜蜂工蜂中肠的蛋白质组学分析 . | 畜牧兽医学报 , 2023 , 54 (04) , 1703-1712 . |
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Abstract :
囊状幼虫病病毒(SBV)是一种常见的蜜蜂病毒,中蜂身上出现的SBV变体,中蜂囊状幼虫病病毒,自从70年代发现以来就是国内中蜂饲养的重要病毒近年也发现能够感染意蜂和其他膜翅目昆虫,但目前qPCR检测法紊乱,没有通用检测法,甚至缺少通用国内分离株的方法。在本研究中我们以Blanchard设计的VP1区域为基础,更新了qPCR的检测方法,设计出一种的TaqMan-MGB探针方法,并检测了几种蜂种,包括意蜂、中蜂。更新后的引物和探针可以和数据库中发表的SBV和中蜂囊状幼虫病病毒基因组匹配,具有灵敏度和灵活性。在VP1区域基因出现更多变体之前,可以作为通用检测和定量的方法。
Keyword :
Ac SBV Ac SBV MGB探针 MGB探针 TaqMan探针 TaqMan探针 囊状幼虫病 囊状幼虫病
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| GB/T 7714 | 张雅昆 , 李润琳 , 黄伟峰 . 通用囊状幼虫病TaqMan-MGB探针定量PCR法 [C] //2021年中国(广西梧州)蜂业博览会暨全国蜂产品市场信息交流会论文集(下册) . 2021 . |
| MLA | 张雅昆 et al. "通用囊状幼虫病TaqMan-MGB探针定量PCR法" 2021年中国(广西梧州)蜂业博览会暨全国蜂产品市场信息交流会论文集(下册) . (2021) . |
| APA | 张雅昆 , 李润琳 , 黄伟峰 . 通用囊状幼虫病TaqMan-MGB探针定量PCR法 2021年中国(广西梧州)蜂业博览会暨全国蜂产品市场信息交流会论文集(下册) . (2021) . |
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Abstract :
一种能降低农药和杀虫剂残留的巢础,其是在蜂蜡中加入活性炭等吸附材料后,依照传统蜂蜡巢础的制作方式制备而成。所得巢础可以有效吸附蜂蜡中的农药和杀虫剂,使其中农药与杀虫剂的残留量降低,以保护幼虫的正常发育,还能避免蜂蜡循环使用过程中残留农药和杀虫剂的累积,从而保障和提升蜂产品的品质。
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| GB/T 7714 | 黄伟峰 , 黄少康 , 陈文彬 . 一种能降低农药和杀虫剂残留的巢础 : CN2017097574W[P]. | 2017-08-16 . |
| MLA | 黄伟峰 et al. "一种能降低农药和杀虫剂残留的巢础" : CN2017097574W. | 2017-08-16 . |
| APA | 黄伟峰 , 黄少康 , 陈文彬 . 一种能降低农药和杀虫剂残留的巢础 : CN2017097574W. | 2017-08-16 . |
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Abstract :
【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术——丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridization-compatible tissue-hYdrogel, CLARITY)在昆虫组织上的应用,确定CLARITY与荧光原位杂交(FISH)相结合在昆虫肠道组织透明化中的适用性。【方法】依照CLARITY技术操作程序,用水凝胶固定西方蜜蜂肠道,并以被动方式透明化,再用靶向东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae 16S rRNA带异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记和靶向真核细胞18S rRNA带Texas RED标记的寡核苷酸荧光探针进行肠道组织的荧光原位杂交,然后用DAPI(蓝色)进行细胞核复染,通过激光共聚焦显微镜观察透明化的染色组织。【结果】首次成功将西方蜜蜂肠道组织透明化。在激光共聚焦显微镜下,观察到马氏管的原始分布形态,以及东方蜜蜂微孢子虫在中肠末端分布更密集的空间分布特征,并实现了对肠道组织的3D重构。【结论】CLARITY能应用于蜜蜂肠道组织透明化,透明化组织能进行原位杂交和激光共聚焦观察。CLARITY和FISH相结合免除抗体制备和石蜡切片的麻烦,直观展示肠道内部的真实状态,为昆虫生理病理研究提供了一种可靠特异的标记方法。
Keyword :
东方蜜蜂微孢子虫 东方蜜蜂微孢子虫 原位杂交 原位杂交 激光共聚焦显微镜 激光共聚焦显微镜 组织透明化技术 组织透明化技术 肠道 肠道 西方蜜蜂 西方蜜蜂
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| GB/T 7714 | 张洋逸 , 黄伟峰 , 何楠 et al. CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用 [J]. | 昆虫学报 , 2019 , 62 (06) : 703-709 . |
| MLA | 张洋逸 et al. "CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用" . | 昆虫学报 62 . 06 (2019) : 703-709 . |
| APA | 张洋逸 , 黄伟峰 , 何楠 , 李佳欢 , 陈文锋 , 黄少康 . CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用 . | 昆虫学报 , 2019 , 62 (06) , 703-709 . |
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Abstract :
本研究利用线粒体COI基因对印度新曲厉螨进行分子鉴定,以期为研究该螨的生物学习性及对蜜蜂的危害提供技术支持。分别从中华蜜蜂、意大利蜜蜂工蜂体上,以及桉树花序上采集试螨,扩增印度新曲厉螨的COI基因,并将获得的COI基因序列在Genbank中Blast对比;利用Genedoc软件分析基因序列的相似性;利用MEGA 7.0计算厉螨科不同种螨之间的遗传距离,构建COI基因的系统发育树。结果表明:采自中华蜜蜂、意大利蜜蜂及桉树花序上的印度新曲厉螨样本COI基因序列完全一致,均表现出明显的A/T碱基偏向性,与同属Neocypholaelaps apicola的COI基因序列的相似性为88%。基于COI基因的印度新曲厉螨的种内的遗传距离(0.00)显著小于与厉螨科6种螨的遗传距离(0.203~0.403)且不存在重叠区域。构建的COI基因的系统发育树显示,采自印度新曲厉螨样本COI与同属的Neocypholaelaps apicola聚同一进化枝,其它不同属螨则按照属的不同聚集在不同的进化枝。本研究所用的线粒体COI基因序列的差异可应用于印度新曲厉螨的分子鉴定。
Keyword :
COI基因 COI基因 分子鉴定 分子鉴定 印度新曲厉螨 印度新曲厉螨
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| GB/T 7714 | 邓洁 , 郭浩杰 , 黄少康 et al. 基于线粒体COI基因的印度新曲厉螨的分子鉴定 [J]. | 环境昆虫学报 , 2019 , 41 (02) : 380-386 . |
| MLA | 邓洁 et al. "基于线粒体COI基因的印度新曲厉螨的分子鉴定" . | 环境昆虫学报 41 . 02 (2019) : 380-386 . |
| APA | 邓洁 , 郭浩杰 , 黄少康 , 林焱 , 黄伟峰 , 段辛乐 . 基于线粒体COI基因的印度新曲厉螨的分子鉴定 . | 环境昆虫学报 , 2019 , 41 (02) , 380-386 . |
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Abstract :
蜜蜂的社会性活动主要通过嗅觉交流完成,借助不同的昆虫信息素和气味分子来实现。虽然劳动分工及主要的嗅觉器官(触角)已经被广泛研究,但是嗅觉如何影响行为的发育仍然不明确。我们对西方蜜蜂刚出房工蜂、哺育蜂及采集蜂的触角中基因的表达量进行了全面的定量分析,同时,组建了实验蜂群来采集相同日龄(10日龄和21日龄)的蜜蜂样本。RNA测序与荧光定量PCR的结果表明有6个基因与哺育行为相关,14个基因与采集行为相关,这些结果可以帮助解释嗅觉与行为变化之间的关系。这些数据可以为劳动分工中潜在的分子机制的研究提供新的观点。
Keyword :
哺育行为 哺育行为 昆虫嗅觉 昆虫嗅觉 行为发育 行为发育 触角 触角 采集行为 采集行为
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| GB/T 7714 | 聂红毅 , 许叔鹏 , 谢翠琴 et al. 工蜂触角中哺育和采集行为相关基因的鉴定 [C] //中国蜂业博览会(江西·南昌)暨2018全国蜂产品市场信息交流会论文集 . 2018 : 192 . |
| MLA | 聂红毅 et al. "工蜂触角中哺育和采集行为相关基因的鉴定" 中国蜂业博览会(江西·南昌)暨2018全国蜂产品市场信息交流会论文集 . (2018) : 192 . |
| APA | 聂红毅 , 许叔鹏 , 谢翠琴 , 耿海洋 , 赵亚周 , 李江红 et al. 工蜂触角中哺育和采集行为相关基因的鉴定 中国蜂业博览会(江西·南昌)暨2018全国蜂产品市场信息交流会论文集 . (2018) : 192 . |
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Abstract :
蜜蜂的社会性活动主要通过嗅觉交流完成,借助不同的昆虫信息素和气味分子来实现.虽然劳动分工及主要的嗅觉器官(触角)已经被广泛研究,但是嗅觉如何影响行为的发育仍然不明确.我们对西方蜜蜂刚出房工蜂、哺育蜂及采集蜂的触角中基因的表达量进行了全面的定量分析,同时,组建了实验蜂群来采集相同日龄(10日龄和21日龄)的蜜蜂样本.RNA测序与荧光定量PCR的结果表明有6个基因与哺育行为相关,14个基因与采集行为相关,这些结果可以帮助解释嗅觉与行为变化之间的关系.这些数据可以为劳动分工中潜在的分子机制的研究提供新的观点.
Keyword :
哺育行为 哺育行为 昆虫嗅觉 昆虫嗅觉 行为发育 行为发育 触角 触角 采集行为 采集行为
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| GB/T 7714 | 聂红毅 , 许叔鹏 , 谢翠琴 et al. 工蜂触角中哺育和采集行为相关基因的鉴定 [C] //2018全国蜂产品市场信息交流会论文集 . 2018 : 178-178 . |
| MLA | 聂红毅 et al. "工蜂触角中哺育和采集行为相关基因的鉴定" 2018全国蜂产品市场信息交流会论文集 . (2018) : 178-178 . |
| APA | 聂红毅 , 许叔鹏 , 谢翠琴 , 耿海洋 , 赵亚周 , 李江红 et al. 工蜂触角中哺育和采集行为相关基因的鉴定 2018全国蜂产品市场信息交流会论文集 . (2018) : 178-178 . |
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Abstract :
本发明公开了一种能降低农药和杀虫剂残留的巢础,其是在蜂蜡中加入活性炭等吸附材料后,依照传统蜂蜡巢础的制作方式制备而成。本发明所得巢础可以有效吸附蜂蜡中的农药和杀虫剂,使其中农药与杀虫剂的残留量降低,以保护幼虫的正常发育,还能避免蜂蜡循环使用过程中残留农药和杀虫剂的累积,从而保障和提升蜂产品的品质。
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| GB/T 7714 | 黄伟峰 , 黄少康 , 陈文彬 . 一种能降低农药和杀虫剂残留的巢础 : CN201710664697.6[P]. | 2017-08-07 . |
| MLA | 黄伟峰 et al. "一种能降低农药和杀虫剂残留的巢础" : CN201710664697.6. | 2017-08-07 . |
| APA | 黄伟峰 , 黄少康 , 陈文彬 . 一种能降低农药和杀虫剂残留的巢础 : CN201710664697.6. | 2017-08-07 . |
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